琼脂糖微球 12B (分子筛SEC，多肽纯化)

一、   产品概述

琼脂糖微球 12B 是一款以高纯度琼脂糖为原料，通过反向悬浮乳化—交联技术制备的 12% 浓度琼脂糖球状层析介质，是本系列中琼脂糖浓度更高、孔径最小、筛分分辨率与机械刚性更高的凝胶过滤（尺寸排阻）介质，球蛋白分级范围为 500 ～ 100,000 Da。

凝胶过滤层析（尺寸排阻层析，Gel Filtration / Size Exclusion Chromatography）依据分子的流体力学体积（尺寸）差异进行分离：大于凝胶排阻极限的分子不能进入微球内部孔道，只能沿微球之间的空隙（外水体积，V₀）流经层析柱，流程最短、更先流出；小于分级下限的小分子可自由进入微球内部孔道（内水体积，Vᵢ），流程最长、最后流出；介于二者之间的分子则按尺寸不同程度地进入孔道而获得分离。整个过程为物理分离，介质与样品之间无离子、疏水等结合作用，缓冲体系可自由选择，分离条件温和，有利于保持生物大分子的天然构象与活性。

12% 高浓度琼脂糖形成致密、窄分布的微孔网络，对短肽、寡核苷酸、核苷酸及小分子蛋白具有极强的尺寸筛分能力；高基质浓度同时赋予微球突出的机械强度、耐压性与流速适应性，柱床稳定、塔板效率高，适合对分辨率要求苛刻的小分子分离与高频重复使用场景。

本产品适用于短肽/多肽、寡核苷酸与核苷酸、小分子蛋白的高分辨率分离、分子量分级与精细脱盐，以及蛋白质样品中小分子盐、辅料、试剂残留的去除，也可作为小分子配基高密度固定化、小分子亲和与离子交换介质的基础骨架，满足实验室研发、中试与规模化生产需求。

二、   产品特点

2.1  系列最小孔径，短肽/寡核苷酸分辨能力最强

12% 琼脂糖提供 500 Da ～ 100 kDa（球蛋白）的分级范围，可对短肽、小分子多肽、寡核苷酸、核苷酸进行精细尺寸筛分，是本系列中可分离分子量下限更低、分辨率更高的型号。

2.2  微孔结构均一，塔板效率高

致密均一的微孔网络配合较窄粒径分布，理论塔板数≥4500/m、峰不对称因子 0.8 ～ 1.2，峰形尖锐、拖尾小，适合对小分子量差异样品的高分辨率分析与制备。

2.3  机械刚性更高，耐压耐高速

高浓度基质机械强度为系列更高，更大工作压力达 0.08 MPa、推荐流速 12 ～ 30 cm/h，柱床抗压缩、不沟流，装柱重复性好，可显著缩短分离周期、便于工艺放大。

2.4  小分子精细脱盐，产物损失低

可高效分离多肽/小蛋白与盐、咪唑、有机溶剂、游离核苷酸、保护基及小分子试剂，替代透析与凝胶过滤脱盐，减少短肽在膜/介质上的吸附损失。

2.5  耐碱耐清洗，稳定性与复用性好

可耐受短期 1 M NaOH 在位清洗及 8 M 尿素、6 M 盐酸胍等，便于彻底去除多肽、核酸污染与内毒素，重复使用次数多，批次稳定性好。

2.6  羟基密集，小分子配基固定化载量高

单位体积活性羟基含量高，适合经 CNBr、环氧、NHS 等活化高密度偶联小分子配基、染料、金属离子、短肽或核苷酸，制备高载量小分子亲和、离子交换、疏水介质。

三、   技术参数

表1  琼脂糖微球 12B技术参数

 四、   储存条件与稳定性

4.1  储存条件

产品出厂时介质以约 50% 悬液浓度保存于 20%（v/v）乙醇水溶液中，应于 2 ～ 8 ℃ 避光、密封保存，严禁冷冻（结冰会破坏琼脂糖珠体结构，导致柱床产生空隙、柱效不可逆下降），并始终保持介质浸没于液面以下，严禁干涸。运输与储存中应避免剧烈震动、倒置与高温暴晒。密封保存条件下，产品自生产之日起保质期为 24 个月；开封后在无菌操作、规范储存条件下可使用 12 个月。

4.2  pH 稳定性

本产品长期连续工作的推荐 pH 范围为 4 ～ 9；短时清洗/再生可耐受 pH 2 ～ 14.0，可使用规定浓度的 NaOH 进行在位清洗与微生物控制，清洗后应立即用纯水或平衡缓冲液冲洗至中性，避免长期高温强碱接触。

4.3  化学稳定性

介质在常用水相缓冲液中稳定，耐受 8 M 尿素、6 M 盐酸胍、30% 乙醇、20% 异丙醇、1 M 乙酸、1 M NaOH（短期）及常规生化缓冲液、中性有机溶剂。

应避免与下列物质/条件接触：强氧化剂（高氯酸盐、过硫酸盐等）、强极性有机溶剂（丙酮、乙腈浓度＞50%）、121 ℃ 高温高压灭菌。

4.4  再生与重复使用

每次分离后，先用 2 ～ 3 倍柱床体积高盐缓冲液（如 2 M NaCl + 20 mM PB，pH 7.4）冲洗去除非特异性吸附杂质，再用 3 ～ 5 倍柱床体积平衡缓冲液重新平衡即可重复使用；污染较重、柱压升高或分辨率下降时按 6.5 进行在位清洗。规范再生与清洗条件下，介质可重复使用多次而分离性能无明显下降；建议在同一项目、同一类样品范围内重复使用，不同样品间不建议交叉使用。