琼脂糖微球 8B (分子筛SEC，大蛋白纯化)

产品货号：QS01063

规格规格：125mL，250mL，500mL

储存条件：4-30℃

产品优势：高流速、高载量、高稳定性

应用场景：蛋白纯化

产品手册：

一、产品概述

琼脂糖微球 8B 是一款以高纯度琼脂糖为原料，通过反向悬浮乳化—交联技术制备的 8% 浓度琼脂糖球状层析介质，定位于中等偏小分子量蛋白质与多肽的凝胶过滤（尺寸排阻）分离，填补了 6B（球蛋白上限 4 MDa）与小孔介质（百 kDa 级）之间的分级窗口，球蛋白分级范围为 5,000 ～ 1,000,000 Da。

凝胶过滤层析（尺寸排阻层析，Gel Filtration / Size Exclusion Chromatography）依据分子的流体力学体积（尺寸）差异进行分离：大于凝胶排阻极限的分子不能进入微球内部孔道，只能沿微球之间的空隙（外水体积，V₀）流经层析柱，流程最短、更先流出；小于分级下限的小分子可自由进入微球内部孔道（内水体积，Vᵢ），流程最长、最后流出；介于二者之间的分子则按尺寸不同程度地进入孔道而获得分离。整个过程为物理分离，介质与样品之间无离子、疏水等结合作用，缓冲体系可自由选择，分离条件温和，有利于保持生物大分子的天然构象与活性。

相较于低浓度大孔型号，8% 琼脂糖形成更致密、均一的中小孔网络，孔道筛分效应更强、机械刚性更好，可在更高流速与压力下保持柱床稳定，同时保留琼脂糖基质低非特异性吸附、高回收率与良好生物相容性的固有优势。

本产品适用于常规治疗性蛋白、抗体片段、酶、细胞因子与多肽的分离纯化、聚体去除及蛋白—小分子分离，也可作为中小分子配基的亲和/离子交换层析基础骨架，适配实验室研发、中试及规模化生产，性能可等效替代同级别进口琼脂糖 SEC 介质。

二、产品特点

2.1 中小孔致密结构，蛋白/多肽分级窗口精准

8% 琼脂糖提供 5 kDa ～ 1 MDa（球蛋白）的分级范围，覆盖绝大多数治疗性蛋白、酶、抗体片段与大分子多肽，可实现目标蛋白与聚体、降解片段、小分子杂质的高效分离。

2.2 刚性提升，可承受更高流速与压力

较高琼脂糖浓度使基质机械强度明显优于 4B/6B，更大工作压力达 0.04 MPa、推荐流速 8 ～ 20 cm/h，柱床不易压缩，装柱与重复使用稳定性好，便于工艺放大与缩短分离周期。

2.3 低非特异性吸附，样品回收率高

高纯度中性琼脂糖基质无带电基团、亲水性强，对蛋白与多肽非特异性吸附极低，目标样品回收率≥95%，可在温和条件下保留蛋白的天然构象与生物活性。

2.4 孔道均一，分辨率与重复性好

精准乳化交联工艺保证孔径与粒径分布均一，理论塔板数≥3500/m、峰不对称因子 0.8 ～ 1.2，对分子量差异约 2 倍的蛋白具有良好基线分离能力，批次间重复性好。

2.5 耐化学清洗，可多次重复使用

可耐受 8 M 尿素、6 M 盐酸胍及短期 1 M NaOH 清洗，能通过标准 CIP 流程去除沉淀蛋白与顽固污染物，重复使用次数多，有效降低耗材成本。

2.6 羟基丰富，便于配基偶联

表面活性羟基可经 CNBr、环氧、NHS 等方法活化，偶联蛋白 A/G、金属离子、抗体、染料等配基，制备中小分子靶向亲和、离子交换或疏水层析介质。

三、技术参数

表1 琼脂糖微球 8B技术参数

参数项目	技术指标
产品名称	琼脂糖微球 8B（Agarose Microspheres 8B）
基质	高纯度 8% 交联琼脂糖凝胶
产品类型	凝胶过滤（尺寸排阻）层析介质；可作为定制化层析介质基础骨架
分级范围（球状蛋白）	5,000 Da ～ 1,000,000 Da
分级范围（葡聚糖）	5,000 Da ～ 300,000 Da
排阻极限（球状蛋白）	1,000,000 Da
粒径范围	40 μm ～ 150 μm（平均粒径约 90 μm）
推荐柱床高度	20 cm ～ 110 cm
推荐线性流速	8 ～ 20 cm/h
更大操作压力	0.04 MPa（0.4 bar）；更高耐受压力 0.05 MPa（0.5 bar）
理论塔板数	≥3500 塔板数/m
工作 pH 范围	4.0 ～ 9.0
pH 稳定性（短时清洗）	2.0 ～ 14.0
推荐工作温度	4 ～ 30 ℃
化学相容性	耐受 8 M 尿素、6 M 盐酸胍、30% 乙醇、20% 异丙醇、1 M 乙酸、1 M NaOH（短期）及常规生化缓冲液、中性有机溶剂
不相容物质	强氧化剂（高氯酸盐、过硫酸盐等）、强极性有机溶剂（丙酮、乙腈浓度＞50%）、121 ℃ 高温高压灭菌
供货悬液浓度	约 50%（沉降介质占悬液总体积的约 50%）
储存缓冲液	20%（v/v）乙醇水溶液
储存温度	2 ～ 8 ℃，避光、防冻、防干涸
保质期	密封保存条件下 24 个月；开封后规范储存可使用 12 个月

四、储存条件与稳定性

4.1 储存条件

产品出厂时介质以约 50% 悬液浓度保存于 20%（v/v）乙醇水溶液中，应于 2 ～ 8 ℃ 避光、密封保存，严禁冷冻（结冰会破坏琼脂糖珠体结构，导致柱床产生空隙、柱效不可逆下降），并始终保持介质浸没于液面以下，严禁干涸。运输与储存中应避免剧烈震动、倒置与高温暴晒。密封保存条件下，产品自生产之日起保质期为 24 个月；开封后在无菌操作、规范储存条件下可使用 12 个月。

4.2 pH 稳定性

本产品长期连续工作的推荐 pH 范围为 4 ～ 9；短时清洗/再生可耐受 pH 2 ～ 14.0，可使用规定浓度的 NaOH 进行在位清洗与微生物控制，清洗后应立即用纯水或平衡缓冲液冲洗至中性，避免长期高温强碱接触。

4.3 化学稳定性

介质在常用水相缓冲液中稳定，耐受 8 M 尿素、6 M 盐酸胍、30% 乙醇、20% 异丙醇、1 M 乙酸、1 M NaOH（短期）及常规生化缓冲液、中性有机溶剂。

应避免与下列物质/条件接触：强氧化剂（高氯酸盐、过硫酸盐等）、强极性有机溶剂（丙酮、乙腈浓度＞50%）、121 ℃ 高温高压灭菌。

4.4 再生与重复使用

每次分离后，先用 2 ～ 3 倍柱床体积高盐缓冲液（如 2 M NaCl + 20 mM PB，pH 7.4）冲洗去除非特异性吸附杂质，再用 3 ～ 5 倍柱床体积平衡缓冲液重新平衡即可重复使用；污染较重、柱压升高或分辨率下降时按 6.5 进行在位清洗。规范再生与清洗条件下，介质可重复使用多次而分离性能无明显下降；建议在同一项目、同一类样品范围内重复使用，不同样品间不建议交叉使用。