Ni-TED Agarose MagBeads（镍-TED琼脂糖磁珠）是新一代高稳定性金属螯合亲和磁珠（IMAC）。产品以超顺磁性交联琼脂糖微球为载体，表面共价偶联五齿配位TED新型螯合配体并稳定负载镍离子，相较于传统NTA磁珠，配位结构更稳定、抗干扰能力更强。
本产品更大优势为耐受高浓度还原剂、螯合剂与强碱清洗，可直接处理含DTT、β-巯基乙醇、低浓度EDTA的复杂细胞裂解样本，无需提前预处理样本，大幅简化实验流程。同时兼容非变性活性蛋白纯化与变性包涵体蛋白纯化，是复杂体系下His标签重组蛋白纯化、高通量筛选、蛋白互作实验的优选介质。
• 超强抗干扰能力：独特五齿TED配位结构，耐受高浓度DTT、β-巯基乙醇及微量EDTA，镍离子不易脱落，适配未经脱螯合剂处理的原始裂解液
• 强碱耐受可CIP清洗：可耐受0.5M NaOH原位清洗，支持严苛再生灭菌，有效去除顽固杂蛋白与生物污染，批次重复性
• 高纯度低非特异吸附：高亲水性交联琼脂糖基质，无多余活性基团，杂蛋白吸附极低，纯化产物纯度显著优于传统镍磁珠
• 双体系通用：完美适配天然活性蛋白纯化、8M尿素/6M盐酸胍变性蛋白纯化，适用绝大多数原核、真核表达体系
• 超顺磁快速分离：无剩磁、不团聚、分散性优异，30秒内完成高效磁分离，适配手动纯化与高通量自动化设备
• 载量稳定耐用：镍离子负载均匀牢固，多次再生后仍保持高结合载量，使用寿命更长，实验成本更低
• 即用型无需活化：出厂预负载镍离子，平衡后即可直接上样，无需繁琐预活化、挂镍操作
技术参数 | 指标标准 |
基质材质 | 4%高交联亲水性琼脂糖 |
磁核材质 | 超顺磁性Fe₃O₄纳米颗粒 |
功能配体 | TED（五齿螯合配体），负载Ni²⁺ |
平均粒径 | 5μm（均一性优异，CV＜5%） |
蛋白结合载量 | ≥15 mg His标签蛋白/mL磁珠悬液 |
磁分离时间 | ≤30 s（0.5T磁力架） |
耐受pH范围 | 3.0–12.0（常规使用）；2.0–14.0（CIP清洗） |
耐受变性剂 | 8M尿素、6M盐酸胍 |
耐受还原剂 | ≤20 mM DTT、β-巯基乙醇 |
耐受螯合剂 | 耐受低浓度EDTA（≤1mM）样本体系 |
CIP清洗耐受 | 0.5M NaOH短期清洗稳定 |
储存体系 | 20%乙醇水溶液，含0.02%叠氮钠 |
保存条件 | 2–8℃避光保存，禁止冷冻 |
货号 | 产品名称 | 规格 | 适用场景 |
QS07011-1 | Ni-TED Agarose MagBeads | 4 mL | 小试摸索、少量样本纯化 |
QS01215-5 | Ni-TED Agarose MagBeads | 20 mL | 实验室常规批量纯化 |
QS01215-10 | Ni-TED Agarose MagBeads | 40 mL | 大规模蛋白制备、高通量筛选 |
• 6×His/8×His标签重组蛋白纯化（原核、真核、哺乳动物细胞表达体系）
• 含还原剂、微量EDTA复杂样本的蛋白纯化，无需样本预处理
• 天然态活性蛋白纯化、高难度包涵体变性蛋白纯化
• 蛋白Pull-down、IP/Co-IP蛋白互作实验，复合物富集纯化
• 高通量蛋白样本筛选、批量功能蛋白制备
• 需严苛清洗、多次重复使用的长期实验体系
通用缓冲液参考（可按需配制）
• 结合缓冲液：20 mM Tris、500 mM NaCl、10–20 mM 咪唑，pH 7.4–8.0
• 洗涤缓冲液：20 mM Tris、500 mM NaCl、40–60 mM 咪唑，pH 7.4–8.0
• 洗脱缓冲液：20 mM Tris、500 mM NaCl、250–500 mM 咪唑，pH 7.4–8.0
• 变性体系缓冲液：添加8M尿素或6M盐酸胍，适配各步骤缓冲液配方
• 清洗再生液：0.5 M NaOH（CIP清洗）、50 mM EDTA（脱镍再生）
1、产品2–8℃取出，室温平衡10–15 min，充分颠倒混匀，保证磁珠完全均匀分散；
2、吸取所需磁珠悬液至离心管，置于磁力架静置30 s，磁珠完全吸附后彻底弃除上清；
3、加入等体积结合缓冲液轻柔重悬洗涤，磁力分离弃上清，重复2次，完成磁珠平衡，即可上样。
6.2 样品结合
1、可直接加入含低浓度DTT、微量EDTA的细胞裂解上清或变性溶解样品，与平衡后磁珠充分混匀；
2、室温翻转孵育30–60 min，低丰度、弱结合蛋白可4℃低速翻转孵育1–2 h；
3、磁力分离30 s，收集流出液，可用于检测蛋白结合效率。
6.3 杂蛋白洗涤
1、加入适量洗涤缓冲液，轻柔吹打重悬磁珠，室温静置5 min，充分洗脱杂蛋白；
2、磁力分离后弃除上清，重复洗涤3–5次，彻底去除非特异性吸附杂质；
3、最后一次洗涤尽量吸干残留上清，避免稀释洗脱液，保证蛋白浓度。
6.4 目的蛋白洗脱
1、加入适量洗脱缓冲液，轻柔重悬磁珠，室温孵育5–10 min；
2、磁力分离后小心收集上清，即为高纯度His标签目的蛋白；
3、为提升蛋白回收率，可重复洗脱1次，合并两次洗脱液备用。
6.5 磁珠再生与CIP清洗
1、常规再生：洗脱后磁珠纯水洗涤2次，50 mM EDTA孵育10 min脱除残余镍离子，纯水洗净后重新挂镍、平衡即可复用；
2、严苛CIP清洗：磁珠可使用0.5M NaOH浸泡5–10 min，彻底去除顽固蛋白残留与微生物污染；
3、清洗后用纯水充分中和洗涤，重新螯合镍离子，20%乙醇重悬，2–8℃保存备用。
• 严禁冷冻磁珠，低温会破坏琼脂糖微球结构，导致磁珠破碎、载量下降、团聚失效；
• 操作全程避免剧烈震荡、高强度吹打，防止磁珠破损，增加非特异性吸附杂质；
• 虽耐受低浓度EDTA与还原剂，高浓度螯合剂（＞1mM EDTA）、超高浓度DTT仍会影响结合效果，建议尽量规避；
• 咪唑浓度需梯度优化，洗涤阶段咪唑过低易残留杂蛋白，过高易造成目的蛋白提前流失；
• 强碱CIP清洗不可长时间浸泡，短时清洗即可，避免长期强碱环境影响磁珠稳定性；
• 产品储存液含叠氮钠，具有毒性，操作时佩戴防护手套，避免接触皮肤、眼睛及黏膜；
• 本产品仅用于科研实验，禁止用于临床诊断、治疗及食品、药品、医美生产等领域。
• 储存条件：2–8℃避光密封保存，严禁冷冻、严禁室温长期敞口放置；
• 未开封有效期：12个月；
• 开封后有效期：6个月（规范密封储存、无污染前提下）；
• 再生使用次数：规范清洗再生，可重复使用8–10次，性能稳定。
常见问题 | 原因分析 | 解决方案 |
蛋白结合率偏低 | 缓冲液pH偏低、初始咪唑浓度过高、样本含高浓度螯合剂、孵育时间不足 | 调节pH至7.5–8.0；降低结合液咪唑浓度；去除高浓度EDTA；适当延长孵育时间 |
蛋白洗脱产量低 | 洗脱咪唑浓度不足、孵育时间短、磁珠未充分重悬 | 提升洗脱咪唑浓度至300–500mM；延长孵育时间；洗脱时充分轻柔重悬磁珠 |
纯化蛋白纯度差 | 洗涤次数不足、洗涤强度低、样本杂蛋白过多 | 增加洗涤次数、优化洗涤咪唑浓度；可添加0.05% Tween-20降低非特异吸附 |
长期复用载量下降 | 再生清洗不彻底、镍离子流失、磁珠轻微污染 | 定期强碱CIP清洗，规范脱镍、重镍流程，彻底清除残留杂质 |
公司名称：江苏千株松生物科技有限公司
公司地址：镇江市句容市宝华镇仙林东路9号双创大厦12楼1217室
技术支持：17302508337（微信同号）
公司网址：www.qianzhusong.com
温馨提示：实验过程中遇到任何技术问题，可随时联系技术支持，我们将提供一对一实验方案优化与技术指导。
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