HIs标签蛋白纯化

Ni TED Agarose Beads 6FF预装柱(镍柱,his标签蛋白纯化)

产品货号:QS01003B

规格规格:1mL,5mL,20mL

储存条件:4-30℃

产品优势:特异性好,载量高

应用场景:His标签蛋白纯化

产品手册:

 

一、   产品概述

Ni TED Agarose Beads 6FF 预装柱是基于 6% 高度交联琼脂糖微球基质,通过共价键偶联 TED 螯合配基并螯合 Ni²离子制备而成的亲和层析预装柱。该产品利用 Ni²与蛋白质表面组氨酸残基的特异性配位作用,实现对多组氨酸标签(His-tag)重组蛋白的高效分离纯化。

TED 配基通过四个配位键牢固螯合 Ni²,具有极低的镍离子泄漏率,可耐受高浓度还原剂与螯合剂,适用于真核分泌表达样品等复杂体系的直接上样纯化,无需繁琐的样品前处理,更大限度保护目标蛋白的生物活性。

本预装柱适配各类中压色谱系统(如 ÄKTA 等),可直接用于蛋白纯化实验,操作简便、重现性好。

二、   核心技术参数

参数项目

技术指标

基质

6% 高度交联琼脂糖凝胶(球形)

配基

TED   螯合配基,螯合 Ni²

平均粒径

90 μm(分布范围:45–165 μm

动态结合载量

≥15   mg 6×His 标签蛋白 /mL 沉降介质

更大操作压力

0.3   MPa(3 bar)

pH   工作范围

2   – 12

CIP   清洗 pH 耐受

1   – 14(短期)

操作温度

4   – 40

储存缓冲液

含   20% 乙醇的水溶液

储存温度

2   – 8 (禁止冷冻)

三、   预装柱规格参数

规格

柱体积

柱尺寸(内径 × 床高)

推荐流速

更大流速

1   mL

1   mL

0.7   cm × 2.5 cm

0.5   – 1 mL/min

2   mL/min

5   mL

5   mL

1.6   cm × 2.5 cm

2   – 5 mL/min

10   mL/min

20   mL

20   mL

1.6   cm × 10 cm

5   – 10 mL/min

20   mL/min


四、   产品特点与优势

1. 高稳定性,低镍泄漏

TED 配基对 Ni²具有超强螯合能力,镍离子结合牢固,纯化过程中金属离子泄漏量极低,避免目标蛋白被污染,同时延长填料使用寿命。

2. 耐受还原剂与螯合剂

可耐受高浓度 DTT、β- 巯基乙醇、TCEP 等还原剂及一定浓度 EDTA,真核细胞分泌表达的 His 标签蛋白无需透析或置换缓冲液即可直接上样,简化实验流程,保护蛋白活性。

3. 高载量与高选择性

对 6×His 标签重组蛋白具有高特异性结合能力,一步纯化即可获得高纯度目标蛋白,适用于原核、真核等多种表达体系。

4. 耐压性优异

高度交联琼脂糖基质机械强度高,可承受较高操作压力,支持快速上样与洗脱,缩短纯化周期。

5. 清洗再生简便

无需脱镍即可直接用 NaOH 进行在位清洗,再生流程简单,可重复使用多次,降低实验成本。


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