一、 产品概述

SP Agarose Beads 6FF 是一种以磺丙基（Sulfopropyl, SP）为功能基团、高度交联 6%琼脂糖为基质的强阳离子交换层析介质。SP 基团为强酸性磺酸基团，在广泛 pH 范围内保持解离状态，带负电荷，可特异性吸附样品中带正电荷的蛋白质、多肽等生物大分子，通过提高洗脱液盐浓度或改变 pH 实现目标物的洗脱与分离纯化。

本产品采用高度交联的 6% 琼脂糖微球为基质，机械强度高，可支持高流速操作，适用于实验室小试到工业规模化生产的各级别生物分离纯化工艺。

二、 产品特点

1.    高流速特性：高度交联的琼脂糖基质具备优异的耐压性能，线性流速可达 400~700 cm/h，显著缩短纯化周期，提高生产效率

2.    高结合载量：离子交换容量达 0.18~0.25 mmol/mL，对溶菌酶动态结合载量可达 130 mg/mL 介质，对核糖核酸酶 A 可达 70 mg/mL 介质

3.    宽 pH 适用范围：工作 pH 范围 4~13，在位清洗（CIP）pH 范围 3~14，耐受强碱性清洗条件

4.    优异的化学稳定性：可耐受 8 M 尿素、6 M 盐酸胍、70% 乙醇、1 M NaOH 等常用试剂，便于再生与消毒

5.    低非特异性吸附：亲水性琼脂糖基质有效降低非特异性结合，目标蛋白回收率高，纯度好

6.    良好的批次重现性：生产工艺严格质控，批次间性能稳定，易于工艺放大与验证

三、 技术参数

续表

四、 应用范围

1.    蛋白质纯化：重组蛋白、酶类、细胞因子等带正电荷蛋白质的捕获与精制

2.    多肽与寡核苷酸分离：阳离子多肽、核酸片段的分离纯化

3.    抗体纯化：抗体片段、碱性抗体亚型的分离与精纯

4.    多糖类物质分离：中性多糖、酸性多糖、粘多糖的分级分离

5.    生物制药下游工艺：单抗、重组蛋白药物的捕获步骤与中间纯化

6.    天然产物提取：植物、微生物来源活性蛋白与多肽的分离富集

五、 操作指南

       5.1  装柱

             1.    将介质与所用缓冲液平衡至实验温度，按介质：缓冲液 = 3:1（v/v）比例制成匀浆，超声脱气 5~10 分钟

             2.    润湿层析柱底部筛网，保留少量缓冲液，确保无气泡

              3.    沿柱内壁一次性缓慢倒入匀浆，避免产生气泡

             4.    打开柱出口，使介质自然沉降，安装柱头

              5.    以 1.3 倍工作流速冲洗柱床，直至柱床高度稳定，标记柱床体积

5.2  平衡

使用 5~10 倍柱床体积的结合缓冲液平衡层析柱，直至流出液 pH、电导率与平衡液一致。

推荐结合缓冲液体系：

·       20 mM 柠檬酸钠缓冲液（pH 5.0~6.0）

·       20 mM 磷酸缓冲液（pH 6.0~7.5）

·       20 mM Tris-HCl 缓冲液（pH 7.0~8.5）

5.3  上样

             1.    样品需经 0.22 μm 滤膜过滤，并置换至结合缓冲液体系

             2.    控制上样流速为 100~300 cm/h，根据目标蛋白性质优化

             3.    上样量建议不超过动态结合载量的 80%，以保证吸附效率

5.4  洗脱

洗脱方式：

·       线性梯度洗脱：0~1 M NaCl 梯度，10~20 倍柱床体积，适用于多组分分离

·       分步洗脱：采用不同盐浓度缓冲液分步洗脱，适用于捕获步骤

·       常用洗脱液：结合缓冲液 + 0.5~1.0 M NaCl，根据目标蛋白等电点调整

5.5  柱后冲洗

使用 2~3 倍柱床体积的高盐溶液（如 2 M NaCl）冲洗，去除非特异性吸附杂质。

六、 维护与再生

6.1  在位清洗（CIP）

             1.    常规清洗：使用 3~5 倍柱床体积的 1 M NaOH 溶液，接触时间 15~30 分钟，流速约100 cm/h

             2.    重度污染：可使用 0.5 M NaOH + 30% 异丙醇，或 0.1% Triton X-100 配合清洗

             3.    清洗后用 5~10 倍柱床体积的纯化水冲洗，再用平衡缓冲液平衡至中性

6.2  再生处理

每次使用后，可用 2 倍柱床体积的 2 M NaCl 冲洗，再用平衡缓冲液重新平衡后即可重复使用。

6.3  注意事项

·       避免介质干涸，始终保持柱床浸没于液体中

·       避免使用强氧化剂，以免破坏琼脂糖基质

·       长期使用后若柱压升高，可反向低流速冲洗，去除柱床顶部积聚的颗粒杂质

七、 保存与运输

1.    保存条件：2~30℃密封保存，保存液为含 0.2 M 醋酸钠的 20% 乙醇溶液

2.  运输条件：常温运输，避免冷冻与暴晒

3.    保质期：未开封状态下保质期 3 年

4.  使用后保存：使用后的介质清洗干净后，置于含 20% 乙醇的缓冲液中 4℃保存，定期更换保存液防止微生物污染