SP强阳离子交换层析预装柱（1mL，5mL和20mL）

一、 产品概述

SP（磺丙基）系列强阳离子交换预装柱是以高交联度琼脂糖为基质，键合磺丙基功能基团的即用型层析柱。该填料具有高电荷密度，在pH < 7的缓冲条件下，能够通过静电作用强力结合带正电荷的蛋白质、多肽及核酸等生物分子。

本系列预装柱专为实验室规模的工艺开发、小规模生产及教学实验设计，提供1mL、5mL和20mL三种常用规格。产品即开即用，性能稳定，重复性好，可完美放大至工业级生产规模。

核心优势：

• 即用型设计： 免去繁琐的装柱过程，节省宝贵时间。

• 卓越的分辨率与载量： 高流速刚性琼脂糖基质，确保在高流速下仍保持高动态载量和优异分辨率。

• 出色的化学稳定性： 耐受高浓度盐、1M      NaOH及常用变性剂，便于CIP（在线清洗）和SIP（在线消毒）。

• 卓越的批间一致性： 严格的质控标准确保每一批产品都具有可靠且可重复的纯化性能。

• 完美的线性放大： 从1mL到20mL，乃至工业级柱层析，方法可轻松转移与放大。

二、 产品规格

三、 规格选择指南

注：实际载量取决于目标分子的特性，建议通过实验确定。

四、 操作指南

1. 系统准备

• 确保您的层析系统（如ÄKTA™ go/pure、中压液相系统等）管路清洁。

• 准备所有所需的缓冲液，并使用0.22 μm或0.45      μm滤膜过滤，以去除颗粒物。

2. 缓冲液推荐

• 平衡/结合缓冲液 (A液): 20-50 mM 缓冲液 (如柠檬酸钠、磷酸钠)，pH 3.0 - 6.0。确保目标分子带正电。

• 洗脱缓冲液 (B液): A液 + 0.5 - 1.0 M NaCl (线性或阶梯梯度洗脱)。

3. 标准操作流程

• 步骤一： 柱平衡

• 将预装柱正确连接到层析系统上，入口端朝下。

• 用3-5倍柱体积的A液，以推荐流速的50%-75%平衡层析柱，直至UV基线、电导和pH值均达到稳定。

• 步骤二： 上样

• 样品需溶解或透析至A液中，并建议离心或过滤以去除不溶物。

• 使用样品环或泵将样品上样至柱中。

• 步骤三： 淋洗

• 用5-10倍柱体积的A液冲洗层析柱，洗去未结合或弱结合的杂蛋白，直至UV信号回到基线。

• 步骤四： 洗脱

• 线性梯度洗脱： 在10-20倍柱体积内，使B液浓度从0%升至，用于分离多种组分。

• 阶梯梯度洗脱： 使用含不同浓度NaCl的B液（如0.1 M， 0.2       M， 0.5 M NaCl）分步洗脱，用于快速获取目标组分。

• 步骤五： 清洗与再生

• 用3-5倍柱体积的1.0 M NaCl溶液高流速冲洗。

• 若分离样品中含有脂质或疏水性强的杂质，可用1-2倍柱体积的0.5 M NaOH溶液清洗，接触时间15-30分钟，然后用去离子水冲洗至中性，最后用平衡缓冲液平衡。

• 步骤六： 储存

• 用5倍柱体积的20%乙醇冲洗层析柱，封闭柱口，于4-8°C环境下储存。

五、 应用示例

示例： 纯化溶菌酶

1. 平衡缓冲液： 20 mM 磷酸钠，pH      7.0。

2. 洗脱缓冲液： 20 mM 磷酸钠，1.0      M NaCl，pH 7.0。

3. 步骤：

• 使用5mL SP预装柱，用平衡缓冲液平衡5个柱体积。

• 上样含有溶菌酶的粗提液。

• 用平衡缓冲液淋洗至UV基线平稳。

• 采用0-洗脱缓冲液的线性梯度，在10个柱体积内完成洗脱。

• 结果： 可获得高纯度、高收率的溶菌酶峰。

六、 注意事项

1. 操作过程中请勿使柱子干涸。

2. 避免使用强氧化剂。

3. 上样前务必确保样品与平衡缓冲液的pH和电导一致。

4. 在改变溶剂或进行清洗时，应避免产生气泡。

5. 请勿撞击或摔落层析柱。

七、 订购信息

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