DEAE弱阴离子交换填料预装柱（1mL，5mL，20mL）

注意： 本手册基于标准DEAE（二乙氨基乙基）弱阴离子交换填料预装柱的设计和使用指南。DEAE是一种弱阴离子交换基团，用于蛋白质、核酸等生物分子的分离纯化。

一. 产品概述

DEAE弱阴离子交换预装柱是一种高效、便捷的层析柱，预装有DEAE功能化的琼脂糖基质。该柱适用于小规模到中规模的蛋白质纯化、样品筛选和优化实验。产品提供1ml、5ml和20ml三种规格，适合实验室手动操作或与自动层析系统（如ÄKTA）兼容。

主要特点：

• 高结合容量：动态结合容量约为70-130 mg HSA/ml 介质（视具体条件而定）。

• 快速分离：优化的填料粒径和孔隙结构，确保高流速下良好分辨率。

• 易用性：预装设计，避免手动装柱，减少气泡和污染风险。

• 兼容性：可用于弱阴离子交换模式，适用于pI > pH的分子。

• 应用：蛋白质纯化、病毒颗粒分离、DNA/RNA纯化等。

二. 规格参数

以下表格列出三种规格柱子的主要技术参数（基于典型产品如HiTrap/HiPrep DEAE FF）：

注： 实际参数可能因制造商而略有差异。请参考产品包装上的具体数据。

三. 存储和稳定性

• 存储条件：柱子应存放在4-30°C的冰箱或室温环境中，避免光照和冻结。预装液通常为20%乙醇溶液，以防止微生物污染。

• 保质期：未开封状态下，保质期为2-3年（从生产日期起）。开封后，建议在3-6个月内使用。

• 稳定性：填料对pH、温度和离子强度稳定，但避免暴露于强酸/强碱（pH<2或>14）超过1小时。

• 运输：室温运输，避免剧烈震动。

如果柱子长时间未使用，请检查是否有沉淀或变色，并进行清洗。

四. 使用方法

4.1 准备工作

• 确保层析系统清洁，无空气泡。

• 准备缓冲液：起始缓冲液（低盐，pH > 目标分子pI）；洗脱缓冲液（高盐梯度，如0-1M NaCl）。

• 去除柱子上的保护盖，并用“滴对滴”方式连接到系统，避免引入空气。

4.2 操作步骤

1. 平衡柱子：用5-10柱体积（CV）的起始缓冲液冲洗柱子，流速为推荐更大流速的50-75%。例如，1ml柱子用5-10ml缓冲液。

2. 加载样品：将样品（预先过滤，调整至起始缓冲液条件）加载到柱子上。加载量不超过结合容量的80%。流速：1ml柱子<1ml/min；5ml<5ml/min；20ml<5ml/min。

3. 洗涤：用5-10 CV起始缓冲液洗涤未结合物质。

4. 洗脱：使用线性盐梯度（如0-500mM NaCl，10-20      CV）或阶梯洗脱。收集馏分，监测UV吸收（280nm）。

5. 再生：用高盐（1-2M NaCl）冲洗后，用水和20%乙醇储存。

4.3 与系统兼容

• 兼容ÄKTA、FPLC等系统。

• 对于手动操作，使用注射器或蠕动泵。

五. 清洗和再生

• 常规清洗：每使用后，用1 CV 1M NaOH清洗（接触时间<30min），然后用水和起始缓冲液中和。

• 深度清洗（CIP）：如果污染严重，用1M NaOH + 1M NaCl混合液清洗1-2小时，然后彻底冲洗。

• 再生次数：柱子可再生使用50-100次，视样品复杂度和维护情况而定。

• 避免：有机溶剂（如丙酮>10%）、高温（>40°C）或机械搅拌。

如果分辨率下降，进行柱效测试（用丙酮峰）。

六. 注意事项和安全信息

• 安全：柱子材料为生物相容性聚丙烯和琼脂糖，无毒。但处理生物样品时，戴手套、护目镜，避免皮肤接触。废弃时，按当地法规处理。

• 注意：避免柱子干涸；如果出现背压升高，检查堵塞并清洗。样品pH应在柱子工作范围内。

• 环境：操作在洁净、通风环境中。

• 免责：本手册为通用指导，不构成保证。实际性能取决于实验条件。请参考具体产品批次数据。

七. 故障排除

八、 订购信息

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