Dextrin Agarose Beads 4FF，MBP标签蛋白纯化

基质（Matrix）

4%高刚性交联琼脂糖微球

配基（Ligand）

糊精 (Dextrin)

粒径范围（Particle Size）

45-165 µm

更大流速（Max Flow   Velocity）

500 cm/h

操作压力（Operating   Pressure）

≤0.3 MPa

结合载量（Binding   Capacity）

~10 mg MBP标签蛋白 / mL 介质

化学稳定性

在常用缓冲液中均稳定

储存溶液（Storage   Solution）

20% 乙醇

储存温度（Storage   Temperature）

2-8°C

1. 平衡

用5-10倍柱体积（CV）的平衡缓冲液冲洗层析柱

推荐：PBS（140 mM NaCl,   2.7 mM KCl, 10 mM Na₂HPO₄, 1.8 mM KH₂PO₄, pH 7.4）

2. 上样

将预处理好的样品以合适流速上样，确保目标蛋白充分结合

控制流速，可根据柱体积调整。若结合不佳，建议将样品与介质在4°C孵育2小时或更长时间

3. 洗杂

用平衡缓冲液冲洗，至UV280nm基线稳定，除去未结合的杂蛋白

平衡缓冲液

4. 洗脱

用含10 mM麦芽糖的缓冲液进行一步洗脱，收集洗脱峰

洗脱缓冲液：用平衡缓冲液配制10 mM 麦芽糖，现配现用

5. 再生

洗脱后，用去离子水冲洗5个柱体积，然后用20%乙醇平衡后保存

也可使用0.5M NaOH溶液进行在位清洗（CIP）以去除顽固杂质

QS01013-5

Dextrin Agarose Beads 4FF

5 mL

QS01013-10

Dextrin Agarose Beads 4FF

10 mL

QS01013-50

Dextrin Agarose Beads 4FF

50 mL

QS01013-100

Dextrin Agarose Beads 4FF

100 mL

QS01013-500

Dextrin Agarose Beads 4FF

500 mL

柱压过高

样品中颗粒物堵塞筛板或介质

1. 清洗或更换筛板。
  2. 确保所有样品和缓冲液都经过0.45 µm滤膜过滤。
  3. 对介质进行在位清洗（CIP）。

目的蛋白不结合或结合量低

1. 蛋白表达量低或未表达。
  2. 样品中含有淀粉酶，降解了配基。
  3. 结合时间不足。

1. 优化蛋白表达条件。
  2. 在培养基中添加葡萄糖以抑制淀粉酶表达。
  3. 降低流速或改用4°C孵育结合2小时。

洗脱峰不集中或拖尾

洗脱条件不佳或柱子没有充分平衡

确保使用正确的洗脱缓冲液，建议使用阶梯梯度洗脱优化条件。

纯化产物纯度低

杂蛋白的非特异性吸附

1. 增加洗杂体积和离子强度。
  2. 在缓冲液中添加1-10 mM DTT以减少非特异性结合。

流速变慢

使用后介质压缩或污染

1. 对介质进行CIP清洗。
  2. 重新装填柱子。