DYKDDDDK或FLAG标签是一种可以通过重组DNA技术添加到蛋白质中的八肽标签。它可以与目的蛋白的N-末端或C-末端融合,便于检测和纯化。千株松 Anti‐Flag Affinity Resin 4FF(QS01016)用于从常用的蛋白表达系统(包括细菌、酵母和哺乳动物细胞)中纯化含DYKDDDDK标签的蛋白。细胞裂解液中含DYKDDDDK标签的蛋白可以特异性地与偶联到填料上的抗DYKDDDDK标签的单克隆抗体结合。通过严格的洗涤步骤消除非特异性结合的杂蛋白,最终以高回收率洗脱目标蛋白。表1列出了Anti‐Flag Affinity Resin 4FF的主要特征。
表 1. Anti‐DYKDDDDK Affinity Resin 4FF的特征
基质 4% 交联琼脂糖
平均粒径 90 μm
配基 小鼠抗DYKDDDDK标签单克隆抗体,单克隆G1
结合能力 大约1mg DYKDDDDK标签蛋白/1 ml沉淀填料
储存条件和稳定性 在2-8°C下可保存12个月。不要冷冻填料。
填料重复使用 可循环使用至少4次。维护得当,可以重复使用10次,结合力几乎没有损失。
洗脱方法 酸性、碱性、中性、多肽竞争或SDS–PAGE上样缓冲溶液洗脱*
试剂的兼容性 与一定浓度的常用试剂相容
*如果用SDS-PAGE上样缓冲溶液洗脱,G1抗体重链变性并从填料中释放。