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江苏千株松生物科技有限公司

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琼脂糖磁珠

NHS琼脂糖磁珠(NHS-activated Agarose MagBeads )

产品货号:QS07002

规格规格:1mL,5mL,20mL

储存条件:-20℃

产品优势:高载量,高灵敏

应用场景:用于蛋白质、多肽、酶、抗体、多糖等生物分子的分离纯化与固定化研究。

产品手册:

一、   产品概述

NHS-activated Agarose MagBeads(NHS活化琼脂糖磁珠)是以高亲水性多孔琼脂糖为基材,复合超顺磁性内核,表面共价修饰N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性基团的功能性磁分离介质。本产品无需EDC、戊二醛等额外活化试剂,可直接与含伯胺基团的抗体、抗原、酶、多肽等生物分子发生共价偶联,形成稳定的酰胺键复合物,具备偶联效率高、非特异性吸附低、磁响应速度快、生物相容性好等优势。

产品全程预活化、即用型设计,适配小体积微量样本到大体积批量样本处理,广泛应用于抗体纯化、蛋白固定、免疫亲和富集、生物分子偶联、免疫检测、靶点蛋白筛选等生命科学研究场景,是生物亲和分离与功能化修饰的核心耗材。本产品仅用于科研实验,严禁用于临床诊断、医疗治疗、食品加工及其他工业用途。

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二、   产品特性与优势

        - 即用型预活化设计:无需EDC/NHS二次活化、无需交联剂预处理,大幅简化实验流程,缩短操作时长,新手易上手,实验重复性更高。

        - 高偶联效率与稳定性:NHS活性基团特异性结合生物分子伯胺基团,形成不可逆稳定共价键,偶联效率远高于普通羧基、氨基磁珠,偶联产物不易脱落、耐洗脱。

        - 极低非特异性吸附:琼脂糖基材亲水性极强,表面无疏水吸附位点,有效降低杂蛋白、杂质非特异性结合,大幅提升产物纯度与实验信噪比

        - 优异磁响应性能:超顺磁性内核加持,磁分离快速彻底,无剩磁、无团聚结块,可适配手动操作与自动化磁珠实验设备。

        - 宽泛适配性:可偶联抗体、抗原、多肽、酶、小分子蛋白等各类含氨基生物配体,适配纯化、富集、固定、检测等多种实验场景。

        - 批次稳定性强:标准化工业化生产,粒径、基团密度、结合容量批次差异极小,保障长期实验数据稳定可靠。

三、   核心技术参数

参数项目

技术指标

产品基材

高亲水性多孔琼脂糖

磁性特性

超顺磁性,无剩磁,可反复磁分离

活化基团

N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)

粒径规格

50~100 μm

更大结合容量

≥30 μg 兔IgG/mg磁珠;20~30 mg 兔IgG/mL磁珠

外观状态

棕褐色均匀磁珠悬液,无结块、无分层沉淀

磁分离时间

室温下10~30 s快速沉降分离

工作pH范围

偶联更优pH 8.0~8.5;稳定保存pH 6.0~7.4

耐受温度

4℃~25℃(常温操作)

储存温度

-20

四、   配套缓冲液配方(推荐)

为保障更佳偶联效果,推荐使用专用缓冲液体系,所有溶液建议现配现用或低温避光保存,预冷使用可减少NHS基团水解失活。

- 清洗液(1mM HCl):用于磁珠预处理清洗,去除保存液残留,活化磁珠表面基团,避免杂质干扰偶联反应。

- 偶联缓冲液(Coupling Buffer):200mM NaHCO₃,pH 8.3,适配绝大多数等电点>7的抗体、蛋白、多肽偶联,提供更优碱性偶联环境。

- 封闭缓冲液(Blocking Buffer):3M乙醇胺,pH 9.0,用于封闭磁珠表面未反应的NHS活性位点,杜绝后续非特异性吸附。

- 保存缓冲液(Storage Buffer):含0.05%叠氮化钠的无菌PBS(pH 7.2~7.4),用于偶联后磁珠成品长期保存,抑制微生物滋生,维持基团稳定。

五、   标准操作流程

5.1 磁珠预处理
1、充分颠倒混匀磁珠原液,吸取实验所需体积的磁珠悬液,置于离心管中;

2、将离心管置于磁力架上,静置10~30s,待磁珠完全沉降后,小心吸弃上清废液;

3、加入预冷1mM HCl清洗液重悬磁珠,轻柔吹打混匀,磁力架分离后吸弃上清,重复清洗3次;
4、加入偶联缓冲液快速清洗1次,吸弃上清,完成磁珠预处理,全程避免磁珠抽干、暴晒,防止结块失活

5.2 生物分子偶联

1、将待偶联的蛋白、抗体等样品充分溶解于偶联缓冲液中,制备均匀样品溶液;

2、将样品溶液加入预处理后的磁珠中,轻柔吹打充分重悬磁珠;

3、室温恒温振荡孵育1~2h,或4℃慢速振荡孵育4~6h,保证偶联反应充分进行;

4、孵育结束后,磁力架分离磁珠,收集上清液,可用于检测偶联残留率。

5.3 位点封闭与后处理

1、向偶联后的磁珠中加入封闭缓冲液,充分重悬;

2、室温振荡封闭30~60min,彻底封闭未反应的NHS活性位点;

3、磁力分离吸弃封闭液,用PBS缓冲液反复清洗磁珠3~5次,去除残留乙醇胺与未偶联杂质;

4、清洗完成后,即可获得功能化偶联磁珠,可直接用于后续纯化、富集等实验。

5.4 成品保存

未立即使用的偶联磁珠,重悬于专用保存缓冲液中,4℃避光密封保存,禁止冷冻、高温存放。

六、   储存与保质期

1. 储存条件

-20℃避光密封保存,严禁暴晒、高温放置,禁止室温长期存放,无需反复冻融。

2. 保质期

原装未开封产品,严格按照储存条件存放,保质期12个月;开封后建议3个月内用完,保证活性更优。

3. 偶联后成品储存

偶联完成的功能化磁珠,4℃保存于含叠氮化钠的PBS缓冲液中,有效期1~2个月,建议尽早使用。

七、   注意事项

        - 基团防失活:NHS活性基团极易在水溶液、高温、酸性环境下水解失活,所有预处理、偶联操作建议低温快速完成,避免长时间暴露在空气中。

        - 杜绝磁珠结块:清洗、孵育过程中严禁将磁珠完全抽干,若出现轻微结块,可轻柔吹打或低速振荡分散,不影响实验效果。

        - 缓冲液禁忌:偶联体系中严禁添加Tris、甘氨酸、氨基醇等含伯胺成分的试剂,此类物质会竞争性结合NHS位点,导致偶联效率大幅下降。

        - 样本适配调整:针对等电点≤7的酸性蛋白,可微调偶联缓冲液pH至7.8~8.0,避免蛋白变性沉淀,保障偶联效果。

        - 操作轻柔:磁珠为多孔微球结构,避免剧烈涡旋、高速离心,防止磁珠结构破损、粒径碎裂。

        - 安全规范:叠氮化钠具有一定毒性,操作时佩戴手套、口罩,废液单独收集处理,避免接触皮肤与口鼻

八、   常见问题与解决方案

常见问题

原因分析

解决方案

偶联效率过低

1.NHS基团水解失活;2.体系含氨基杂质;3.偶联pH不适配;4.孵育时间不足

低温快速操作,更换新鲜缓冲液;排查去除体系中Tris、甘氨酸等试剂;校准缓冲液pH;适当延长孵育时长

非特异性吸附偏高

1.封闭不充分;2.清洗次数不足;3.样本杂质过多

延长封闭时间、保证封闭液浓度;增加PBS清洗次数;提前纯化样本,去除杂蛋白

磁珠结块团聚

磁珠被抽干、剧烈震荡、温度骤变

避免完全抽干磁珠,轻柔吹打重悬,稳定实验温度,结块后轻柔振荡分散

磁分离速度变慢

磁珠长期存放轻微沉降、体系粘度偏高

使用前充分混匀磁珠;降低样本体系粘度,保证缓冲液配比标准

九、   应用场景

- 生物分子固定:抗体、抗原、酶、多肽等氨基生物分子的共价固定;

- 亲和纯化:特异性抗体、重组蛋白、免疫复合物的高效分离纯化;

- 免疫富集:低丰度靶点蛋白、微量抗原抗体的富集与浓缩;

- 免疫检测:ELISA、胶体金、免疫印迹等实验的功能化载体;

- 科研机制研究:蛋白互作、靶点筛选、生物传感器构建等基础研究。

十、   售后服务说明

本产品经过严格质检,批次性能稳定、质量可控。若产品存在质量问题、性能不达标,可凭订单信息与产品批次号申请售后退换、技术支持;我司提供全程实验技术指导,可协助客户优化偶联、纯化实验方案,解决各类实验问题。

技术支持:17302508337(微信同号)

官网地址:www.qianzhusong.com

十一、免责声明

1、本产品仅适用于科学研究用途,禁止用于临床诊断、人体治疗、食品药品加工、商业生产等领域,违规使用造成的一切后果,本公司不予承担。

2、用户需严格按照本手册操作流程进行实验,因私自更改实验参数、操作规范、储存条件导致的产品失效、实验失败,不在产品质保范围内。

3、本产品参数与操作指南会随产品迭代持续更新,如有微调,恕不另行通知,最新版本以官方公示为准。

 


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