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如何利用Strep-Tactin系统进行蛋白的表达和纯化(五)

作者:千株松生物 发布时间:2023-10-16 23:12:52点击:415

信息摘要:
  • Strep-Tactin填料应冷藏2-8°C以延长储存时间。
  • 我们建议每个柱子使用5次。
  • 树脂耐受8M盐酸胍清洗。清洗过程不应持续超过30分钟,之后应立即用缓冲液W(千株松,QS05038)平衡树脂。
  • 如果使用缓冲液W不能有效地从Strep-Tactin Resin中去除HABA,我们建议使用pH 10.5(或100 mM Tris碱)的缓冲液W,以有效地从Strep-Tactin Resin中去除HABA。

Strep-Tactin树脂的储存和再生

重要信息:

  • Strep-Tactin填料应冷藏2-8°C以延长储存时间。
  • 我们建议每个柱子使用5次。
  • 树脂耐受8M盐酸胍清洗。清洗过程不应持续超过30分钟,之后应立即用缓冲液W(千株松,QS05038)平衡树脂。
  • 如果使用缓冲液W不能有效地从Strep-Tactin Resin中去除HABA,我们建议使用pH 10.5(或100 mM Tris碱)的缓冲液W,以有效地从Strep-Tactin Resin中去除HABA。

使用重力柱再生Strep-Tactin Resin

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1. 用5 CVs再生缓冲液R(千株松,QS05042)洗涤3次。

从黄色到红色的颜色变化表示再生过程,红色的强度是柱子活性状态的指示器。

2. 当柱底部的红色与柱顶部的红色具有相同的强度时,再生完成。如果不是这种情况,请使用更多的再生缓冲液R。

3.多加2mL缓冲液W或R用于存储。

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4. 2-8℃保存填料。在下次纯化之前,用4 CVs的缓冲液W洗涤两次填料来去除缓冲液R。对于高载量填料,要使用pH 10.5的4 CV缓冲液W去除HABA。之后,立即将柱缓冲液更换为pH值为8.0的缓冲液W,因为长期暴露于pH值10.5可能对树脂有害。


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