BCA蛋白浓度测定试剂盒（QS05001）

BCA蛋白浓度测定试剂盒

产品货号：QS05001

产品规格：250T，500T，1000T

产品简介:

BCA蛋白浓度检测的原理是根据吸光值可以推算出蛋白浓度。碱性条件下，蛋白将Cu²⁺还原为Cu⁺， Cu⁺与BCA试剂形成紫颜色的络合物，两分子BCA螯合一个Cu⁺。将该水溶性复合物在562nm处的吸收值，与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。

产品组成：

使用说明（仅供参考）:

BCA工作液配置：

         取50mL的BCA试剂A与1mL的BCA试剂B混合，配成51 mL的BCA工作液。两者混合时会有沉淀形成，彻底混匀后沉淀消失，溶液应为澄清淡蓝色溶液。

        注：BCA工作液室温放置一周不失效。

微孔板测定程序：（工作范围20-2000 μg /mL）

1、蛋白标准品配制：室温完全溶解蛋白标准品，取20 μL 5mg/mL BSA蛋白标准溶液用PBS溶液稀释至100 μL，使其终浓度为1.0 mg/mL

2、按照下表配制BSA标准测定溶液：

3、将适当体积的待测样品加入到微孔板中，并用PBS补足到20 μL

4、向微孔板中加入200 μL BCA工作液，混匀，37℃放置30分钟；

注：也可以室温放置2小时或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深并且显色反应会应温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育或适当延长孵育时间。

5、测定562nm处的吸光度，并记录读数；以不含BSA的样品的吸光值作为空白对照。

6、以A562为纵坐标，BSA含量为横坐标，绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内，请稀释样品后重新测定。

试管测定程序：（工作范围 20-1000 μg /mL）

1、蛋白标准品配制：室温完全溶解蛋白标准品，取150 μL 5mg/mL BSA蛋白标准溶液用600μL PBS溶液稀释至750 μL，使其终浓度为1.0 mg/mL

2、按照下表配制BSA标准测定溶液：

3、将适当体积的待测样品加入到微孔板中，并用PBS补足到100 μL

4、向微孔板中加入2 mL BCA工作液，混匀，37℃放置30分钟；

5、测定562nm处的吸光度，并记录读数；以不含BSA的样品的吸光值作为空白对照。

6、以A562为纵坐标，BSA含量为横坐标，绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内，请稀释样品后重新测定。

产品特点：

1.灵敏度高，检测浓度下限达到25 μg /mL(在20-1000 μg /mL浓度范围内有较好的线性关系)，最小检测蛋白量到0.2μg，待测样品体积1-20μL。

2. 常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒（千株松，QS05002）。

保存条件：

BCA试剂A和B可以室温贮存；牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存；PBS溶液4℃贮存。

本试剂盒有效期1年。