ECL化学发光HRP底物(超敏)（QS05056）

产品简介

ECL化学发光HRP底物(超敏)是一种预混的，现成的化学发光检测试剂，用于PVDF和硝化纤维转移膜上的western或dot/slot/spot blotting应用，并与所有常用的缓冲液和阻断试剂兼容。HRP底物由鲁米诺试剂和过氧化物溶液组成。将等体积的鲁米诺试剂和过氧化氢溶液混合制备HRP底物。

产品成分

鲁米诺试剂，双氧水

使用方法

1. 按常规Western blot操作进行，二抗孵育后，在进行最后一次洗涤时根据膜的大小（每10 cm2 膜混合0.5 mL Solution A和0.5 mL Solution B），按照Solution A: Solution B=1:1比例配制发光检测工作液。

注：工作液建议现配现用，配制后室温放置数小时后灵敏度可能略有降低。

2. 用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的液体。膜的蛋白面朝上，用吸管将配制的发光检测液转移到蛋白膜上，使其均匀覆盖，室温孵育2 min。

注：增加孵育时间不会增加灵敏度，有时还会导致条带曝光时显示异常。发光过程的本质是酶促反应，加入发光液过少同样不利反应进行，会导致膜上条带曝光不均和灵敏度明显降低。

3. 用平头镊子夹持蛋白膜，膜的下缘轻轻接触吸水纸，以去除膜上多余的发光液。将膜的蛋白面朝上并包裹于洁净保鲜膜内，轻轻赶出气泡。

4. 压片检测：将膜固定在暗盒后，暗房内取出X光胶片放置暗盒中压片1分钟，立即显影定影，根据其曝光结果，缩短或延长下一张X光胶片的压片时间。

5. 化学发光成像仪检测：将膜直接放置于化学发光成像仪载物台中，然后参考仪器的说明书进行信号检测。

温馨提示

1．Solution A和Solution B在吸取过程中必须要更换枪头，两种溶液相互污染后会导致逐渐失效，影响后续的使用效果；

2．各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效；

3．ECL的荧光持续时间很长，但开始反应后的30分钟内荧光更强一些，随后荧光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这荧光较强的30分钟进行压片；

4．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！